L’électrophorèse est une méthode analytique dans laquelle un courant électrique contrôlé est utilisé afin de séparer les biomolécules en fonction de leur rapport taille/charge électrique, en utilisant une matrice gélatineuse comme base. Cette technique a une variété d’utilisations pratiques, telles que la médecine légale pour l’identification humaine, le projet du génome humain, la recherche sur les protéines et les mutations génétiques et les tests de diagnostic clinique.
Quel matériel est utilisé dans cette technique ?
L’électrophorèse est réalisée avec un équipement composé d’une charge négative à une extrémité et d’une charge positive à l’autre, appelé système d’électrophorèse. Lors de l’insertion de molécules chargées, dans cet environnement, les négatives iront à un extrême et les positives à l’autre correspondant. Par exemple, lors de l’analyse de protéines sur gel, dans ces kits, la protéine entière est prélevée pour analyser sa taille. De cette façon, les plus courtes migreront plus rapidement vers les pôles et se refléteront dans la partie inférieure du gel. Au lieu de cela, le plus long sera au sommet.
Comment ça marche?
Lorsqu’un mélange de molécules ionisées et chargées net est positionné dans un champ électrique, ils subissent une force d’attraction vers le pôle qui a la charge opposée, permettant aux molécules chargées positivement de se déplacer vers la cathode (pôle négatif) pendant un certain temps chargée positivement se déplacera vers l’anode (pôle positif).
L’électrophorèse est une technique courante en laboratoire clinique. Il permet la séparation d’espèces chimiques (acides nucléiques ou protéines) le long d’un champ électrique en fonction de leur taille et de leur charge électrique.
Certains types d’électrophorèse
Electrophorèse sur papier filtre et acétate de cellulose : La technique d’électrophorèse avec papier filtre comme support est rarement utilisée, et son utilisation est limitée à la séparation des acides aminés. En revanche, l’électrophorèse sur acétate de cellulose ou cellogel présente un certain nombre d’avantages par rapport au papier filtre. Il permet la séparation des protéines, des migrations plus rapides et a une résolution plus élevée.
Électrophorèse sur gel d’agarose : Le gel d’agarose est un bon support électrophorétique. De plus, sa nature lui confère la particularité de pouvoir séparer des molécules en fonction de leur taille. Ce support permet de séparer les acides nucléiques en fonction de leur taille. Il est utilisé pour séparer les grosses molécules.
Électrophorèse sur gel de polyacrylamide : Le gel de polyacrylamide est considéré comme le meilleur support. Ils ont également une grande stabilité mécanique et sont insolubles dans l’eau. Parmi tant d’avantages, il y a un inconvénient qui en limite l’utilisation : il est neurotoxique. Il est utilisé pour la séparation des protéines et, comme le gel d’agarose, permet la séparation des molécules en fonction de leur taille.
L’électrophorèse capillaire : Cette technique diffère beaucoup des précédentes. Le support est différent, puisqu’il utilise des capillaires de silice fondue, recouverts d’une couche de polyimine. Les résultats sont visualisés sur un écran d’ordinateur.
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