L’électrophorèse consiste en une technique qui permet la séparation de biomolécules selon leur mobilité et leur nature dans un champ électrique sur une matrice poreuse, c’est l’une des techniques de biologie moléculaire les plus utilisées en laboratoire. Puisque grâce à l’électrophorèse, nous pouvons séparer les fragments d’ADN et d’ARN en fonction de leur taille, les visualiser au moyen d’une simple coloration, et ainsi déterminer la teneur en acides nucléiques d’un échantillon, en pouvant avoir une estimation de sa concentration.
À l’heure actuelle, la technique d’électrophorèse avec ses différentes modifications et compléments est utilisée quotidiennement pour séparer les molécules de protéines et d’acides nucléiques et est complétée par une grande variété d’instruments modernes qui ont augmenté sa précision dans la séparation de ces biomolécules, facilitant leur manipulation. .
Où l’électrophorèse est-elle effectuée ?
La technique d’électrophorèse est réalisée dans un équipement composé d’une charge négative à une extrémité et d’une charge positive à l’autre. En plaçant les molécules chargées dans cet environnement, celles chargées négativement se déplaceront vers l’extrémité positive, et celles chargées positivement vers l’autre extrémité correspondante. L’électrophorèse utilise la différence de taille et de charge de diverses molécules dans un échantillon. L’échantillon d’ADN, d’ARN ou de protéine à séparer est chargé sur un gel poreux placé dans un environnement tampon ionique. Dans l’utilisation de la charge électrique, chaque molécule ayant des tailles et des charges différentes se déplacera à travers le gel à des vitesses différentes.
Étapes d’électrophorèse
- Obtention des échantillons.
- Préparation du gel
- Préparation d’échantillons avec tampon de chargement
- Chargement des échantillons
- Piste de gel
- Coloration en gel
- Visualisation du gel à la lumière UV et analyse des résultats
Comment se déroule l’électrophorèse sur gel ?
Le gel utilisé dans l’électrophorèse sur gel est généralement fabriqué à partir d’agarose ou de polyacylamide. Ce gel poreux peut être utilisé pour séparer des macromolécules de différentes tailles. Le gel est immergé dans une solution tampon dans une chambre d’électrophorèse.
La mobilité électrophorétique est la vitesse à laquelle chaque molécule se déplace à travers le gel et est principalement déterminée par sa charge nette et sa taille. Les molécules fortement chargées se déplacent plus rapidement que les molécules faiblement chargées. Les petites molécules se déplacent également plus rapidement.
Une fois la séparation terminée, le gel est coloré avec un colorant pour révéler les bandes de séparation. Le bromure d’éthidium est un colorant fluorescent couramment utilisé en électrophorèse sur gel. Le gel est trempé dans une solution diluée de bromure d’éthidium puis placé dans un transilluminateur UV pour visualiser les bandes de séparation. Les bandes sont immédiatement examinées et photographiées.
Chez Kalstein, nous sommes FABRICANTS d’équipements de laboratoire et nous vous proposons d’excellents systèmes d’électrophorèse aux meilleurs PRIX du marché, conçus avec la plus haute qualité. C’est pourquoi nous vous invitons à consulter le menu Produits. ICI