L’étalonnage des cyclistes thermiques est un processus important pour s’en occuper. C’est pourquoi tous les points de vue doivent être clairs pour calibrer l’un d’entre eux. Parmi ceux-ci sont des points de vue biologiques moléculaires, qui se concentrent sur la copie d’une réaction de PCR à la vue des métrologues.
C’est pourquoi l’étalonnage doit être effectué par du personnel qualifié, c’est-à-dire qu’aucune personne ordinaire ne peut l’essayer. N’oubliez pas que les années d’études sont effectuées pour cela. Les points de vue doivent également être effectués dans des conditions environnementales définies qui permettent le processus, ainsi que des circonstances.
Calibrage par imitation du processus de PCR
Si nous le prenons du point de vue d’un biologiste moléculaire, c’est la meilleure façon de calibrer n’importe quel thermocycleur tant que c’est le processus qui imite le processus PCR. Le processus correct est de mettre des tuvos dans des puits de blocs, remplissez le mélange réactionnel et placez les capteurs. Ensuite, passez ensuite aux tubes fermés et aux cyclistes thermiques avec le couvercle thermique afin de développer le protocole PCR utilisé dans le laboratoire.
Tout ce processus doit être sous une température réelle dans un tube rempli d’un mélange réactionnel particulier. Tout cela doit se produire lors du protocole PCR effectué à partir d’un instrument particulier.
Chaque combinaison de mélange, avait ou jusqu’à ce que le protocole et l’instrument d’étalonnage soient répétés. Cela rend la charge de travail beaucoup plus grande. C’est pourquoi les résultats ne peuvent même pas être comparés entre eux. Pas même à aucune sorte de norme ou de spécification établie par le fabricant.
N’oubliez pas que cette façon d’étalonnerait littéralement de nombreuses variables hors de contrôle. Par conséquent, l’ajout d’une grande composante d’incertitude est la meilleure façon de se terminer par des incertitudes comprises entre plus de 2 ° C. Maintenant, lorsque l’incertitude est d’environ 2 ºC, et en même temps la mesure de 96 ºC Il arrive que la température du cyclot thermique peut se produire dans n’importe quelle plage comprise entre 94 ºC et 98 ºC.
Il convient également de garder à l’esprit que la différence de température pourrait avoir des répercussions sur l’inactivation de TAQ polymérase. Par conséquent, le niveau d’incertitude n’est pas du tout agréable dans l’étalonnage du cycleur thermique. Toutefois, si le processus de PCR est copié, cela peut sembler une option tentante.
Étalonnage du processus représentatif
D’une perspective, la meilleure façon d’étalonner un ustensile tel que le cycleur thermique est par mesure représentative et standard du processus de PCR. La méthode permet l’étalonnage de toutes les PCR standard. La dynamique et sa partie statique doivent être prises en compte lors du processus de PCR. Ceci est important car il y a des problèmes qui ne peuvent pas être connus avec l’œil nu, ou plutôt avec le contrôle statique d’une PCR.
Les températures proches de la dénaturation, de l’allongement et de l’hybridation doivent être évaluées un par un. Les effets qu’ils peuvent avoir peut varier en fonction de la température.
Étalonnage selon les normes internationales
Si vous travaillez dans la zone de météorologie, cela pourrait être la zone idéale pour calibrer un cycleur thermique. En matière de météorologue, un étalonnage est défini comme des opérations nécessaires dans certaines conditions spécifiques.
Au cours de cette traçabilité de processus est garantie en utilisant des normes de référence et l’expression des valeurs responsables de l’étalonnage des unités SI. Cependant, en raison de cette incertitude calculée à partir du résultat de l’étalonnage. En plus du fait que les mêmes étalonnages ne soient fabriqués que par des ingénieurs spécialisés dans l’étalonnage qui sont littéralement compétents et qualifiés pour effectuer de telles actions.
Comment savoir si un étalonnage est complètement sûr
- L’étalonnage doit être mesuré avec des caractéristiques thermiques qui incluent un résultat de PCR. Parmi eux, la précision, l’excès ou la portée, la vitesse de chaleur cool, le temps de rétention et l’uniformité.
- Un processus dynamique doit être effectué au lieu d’une statique.
- Il est essentiel de réaliser plusieurs canaux pour exclure les effets de temps entre les puits.
- Il est très important d’avoir des conditions environnementales contrôlées.
- Le personnel autorisé doit avoir l’expérience nécessaire pour mener à bien ces actions.
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