Le cryostat est un équipement utilisé dans le traitement des échantillons pour le diagnostic ou l’identification histologique ou histopathologique. Il est principalement utilisé pour congeler et obtenir des coupes de tissus ou des échantillons congelés qui n’ont pas été préalablement fixés par des méthodes chimiques, afin d’éviter de perdre certaines caractéristiques importantes nécessaires à l’observation.
En d’autres termes, il s’agit d’un instrument utilisé dans les laboratoires d’anatomie pathologique afin d’obtenir des coupes de tissus à partir de matériel congelé et ainsi atteindre des épaisseurs allant de 8 à 40 µm, pour une observation au microscope optique.
La congélation des tissus est un moyen rapide de les durcir sans avoir besoin d’enrobage, de sorte que la préservation moléculaire est maximisée. Mais pour conserver correctement la structure du tissu, il faut une congélation très rapide qui empêche la formation de cristaux de glace qui détériorent les structures cellulaires.
Comment fonctionne cette équipe ?
Les deux appareils les plus couramment utilisés pour congeler les coupes sont le microtome de congélation et le cryostat. Dans le cas du cryostat, le mécanisme de rotation et de coupure du cryostat est situé à l’intérieur d’une enceinte réfrigérée, à une température comprise entre -20 et -30°C. Dans cette chambre se trouve l’échantillon, la lame et c’est là que les sections sont collectées, un processus par lequel les sections sont collées sur une lame.
La congélation est généralement effectuée sur une plate-forme à l’intérieur de la chambre réfrigérée elle-même avec le système Peltier. Vous pouvez également congeler le tissu en externe aussi rapidement que vous le souhaitez, par exemple avec de l’azote liquide, mais il est pratique de placer l’échantillon dans la chambre du cryostat jusqu’à ce que sa température soit égale à celle du cryostat pour obtenir des coupes homogènes. Avant congélation, l’échantillon est noyé dans un milieu liquide à température ambiante et solide à la coupure. Par conséquent, nous avons notre échantillon dans un bloc solide, intégré mais non inclus. Cela permet à l’échantillon d’être manipulé et attaché à un porte-échantillon, qui sera fixé à un arbre qui avance sur la lame.
Types de cryostat
- Compresseur unique : Les modèles à compresseur unique peuvent contrôler à la fois la température à l’intérieur de la plaque de congélation et de la chambre de refroidissement. Ce processus implique généralement un système d’évaporation, qui permet à la chambre de refroidissement et à la plaque de congélation d’atteindre des températures cryogéniques.
- Double compresseur : Avec le modèle à double compresseur, il y a un compresseur pour contrôler la température de la plaque de congélation et un autre pour contrôler la chambre de refroidissement. Pour cette raison, vous pouvez refroidir les échantillons plus rapidement avec la congélation rapide et atteindre des températures plus basses par rapport à un modèle à compresseur unique.
- Cryostat rotatif : Ce sont des cryostats qui ont des dépliants sur le côté de l’appareil. Tourner le volant dans le sens des aiguilles d’une montre démarre le processus de coupe. Au fur et à mesure que les échantillons descendent avec le volant, les sections sont faites. L’épaisseur de coupe se fait également au point d’inversion supérieur du mouvement de coupe.
- Cryostat motorisé : Ceux-ci ont un entraînement de coupe motorisé pour sectionner les échantillons. La vitesse de coupe peut être ajustée de sorte que les matériaux plus durs puissent sectionner plus lentement que les matériaux plus mous.
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